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全球數(shù)百萬人正遭受類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和炎癥性腸病等慢性炎癥疾病的折磨。TNF-α,一種關(guān)鍵的促炎細胞因子,在這些疾病的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色。TNF-α主要由活化的巨噬細胞產(chǎn)生,通過與其細胞表面受體結(jié)合,啟動和放大炎癥級聯(lián)反應(yīng)。因此,準確檢測TNF-α的含量對于疾病診斷、療效評估以及相關(guān)研究至關(guān)重要。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)憑借其高靈敏度和特異性,已成為TNF-α定量檢測的金標準。高效、可靠的TNF-α定量檢測方法對于相關(guān)研究和疾病診療至關(guān)重要。本文將重點介紹TNF-α ELISA試劑盒,幫助您深入了解其原理、優(yōu)勢和應(yīng)用。
ELISA試劑盒在國內(nèi)有多種叫法,例如酶聯(lián)免疫試劑盒、ELISA檢測試劑盒等。ELISA試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù),基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理,主要用于檢測樣本中的特定抗原或抗體。TNF-α是一種促炎細胞因子,通常采用雙抗體夾心法進行檢測。雙抗體夾心法需要兩種針對不同抗原表位的抗體,一種包被在微孔板上用于捕獲抗原,另一種偶聯(lián)HRP用于檢測結(jié)合的抗原。將標本和標準品分別加入到預(yù)先包被TNF-α捕獲抗體的微孔中,然后加入HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,加入終止液后轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中TNF-α的濃度呈正相關(guān)。通常在450nm波長下用酶標儀測定吸光度(OD值),根據(jù)標準曲線計算樣品濃度。
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6 管 | 0.3mL*6 管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖 液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 3mL |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
能夠檢測極低濃度的TNF-α,提高實驗的準確性。適用于多種生物樣本(如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等)。
采用高質(zhì)量的單克隆或多克隆抗體,確保與TNF-α特異性結(jié)合,降低交叉反應(yīng)。
試劑盒中的預(yù)包被板和標準品經(jīng)過優(yōu)化,具有較長的有效期和較好的批間穩(wěn)定性。
預(yù)包被96孔板,減少實驗步驟,提高實驗效率。經(jīng)過優(yōu)化的實驗條件,使實驗重復(fù)性良好,降低誤差。
經(jīng)過嚴格質(zhì)控,確保不同批次之間數(shù)據(jù)的可比性,減少實驗誤差。